Mario es el icónico fontanero en una aventura RPG donde debe rescatar a la princesa Peach y salvar el Reino Champiñón del malvado Bowser. A lo largo del juego, Mario utiliza sus clásicas habilidades como saltar y golpear con el martillo, además de reclutar aliados con habilidades únicas. Su objetivo es reunir los siete Espíritus Estelares para enfrentarse a Bowser y restaurar la paz.
Goombario es el primer compañero de Mario. Es un joven y entusiasta Goomba que admira a Mario y sueña con ser un gran aventurero. Goombario puede usar su habilidad especial "Tattle" para proporcionar información sobre los enemigos y entornos, revelando datos útiles durante las batallas. También puede atacar saltando sobre los oponentes y es un fiel aliado en la misión para salvar el Reino Champiñón.
Bombette es una Bob-omb rosada y explosiva que se une a Mario. Es una compañera valiente y decidida, liberada por Mario de una prisión en la Fortaleza Koopa. Su habilidad principal es explotar para destruir muros y activar interruptores, lo que ayuda a Mario a progresar en el juego. En combate, Bombette también utiliza sus poderosas explosiones para infligir gran daño a los enemigos, convirtiéndose en una de las aliadas más útiles durante la aventura.
Kooper es un Koopa valiente y amigable. Vive en Pueblo Koopa y sueña con ser un gran aventurero. Su habilidad principal es lanzar su caparazón, lo que le permite alcanzar objetos lejanos, golpear interruptores o atacar enemigos alineados. En combate, Kooper es útil para atacar múltiples enemigos terrestres con su caparazón giratorio, haciéndolo un aliado clave en las batallas y exploraciones durante la aventura de Mario.
Parakarry es un Paratroopa y el cartero oficial del Reino Champiñón. Se une a Mario después de que lo ayudas a recuperar varias cartas perdidas durante su trabajo. Su habilidad principal es llevar a Mario en cortas distancias aéreas, lo que permite cruzar huecos inaccesibles. En combate, Parakarry utiliza sus habilidades de vuelo para atacar enemigos tanto en tierra como en el aire, con movimientos como el poderoso "Shell Shot". Es un aliado leal y esencial para completar la misión de Mario.
Bow es una Boo aristocrática y carismática. Como líder de la Mansión Boo, tiene una personalidad fuerte y segura. Su habilidad principal es volver invisible a Mario y a ella misma, lo que les permite evitar enemigos y peligros. En combate, Bow usa su abanico para golpear a los enemigos con movimientos rápidos, como su característico ataque "Smack". Su capacidad para hacer a Mario intangible también es útil para esquivar ataques enemigos, lo que la convierte en una compañera estratégica y valiosa en la aventura.
Sushie es una Cheep-Cheep, una especie de pez. Es la encargada de cuidar a los pequeños Yoshi en la Isla Lavalava y se une a Mario para ayudar a rescatar a los Yoshi perdidos. Su habilidad principal es permitirle a Mario nadar en cuerpos de agua, lo que desbloquea nuevas áreas en la aventura. En combate, Sushie utiliza ataques basados en agua, como "Squirt", que son efectivos contra enemigos de fuego. Es una compañera confiable y esencial cuando las aguas se vuelven parte del desafío.
Watt es un pequeño y valiente espíritu eléctrico. Es liberado por Mario de una linterna durante su aventura en Shy Guy's Toy Box. Su habilidad principal es iluminar áreas oscuras, lo que permite a Mario ver en cuevas o lugares oscuros, y también revela objetos ocultos. En combate, Watt usa ataques eléctricos que atraviesan las defensas de los enemigos, lo que la convierte en una compañera invaluable para enfrentar oponentes con alta protección.
Lakilester es un ex-Lakitu de la fuerza de los Shy Guys que decide unirse a Mario después de que le ayudas a recuperar su hogar. Su habilidad principal es lanzar a Mario sobre obstáculos y enemigos desde su nube, permitiéndole volar por encima de barrancos y alcanzar áreas inaccesibles. En combate, Lakilester usa su "Cloud Nine" para lanzar a los enemigos al aire, y también puede atacar con su "Laki Cloud" para infligir daño. Es una valiosa adición al equipo por su capacidad para facilitar el acceso a nuevas áreas y su habilidad de combate versátil.